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核酸檢測試劑原材料有哪些呢,趕緊來看看吧

更新時(shí)間:2020-12-17      點(diǎn)擊次數(shù):20353
   核酸檢測試劑原材料有哪些呢,趕緊來看看吧
  核酸檢測試劑是基于核酸擴(kuò)增檢測技術(shù)的體外診斷試劑,包括等溫?cái)U(kuò)增、PCR,qPCR等。現(xiàn)在有些實(shí)驗(yàn)室自己合成引物探針,生產(chǎn)qPCR診斷試劑,也有些試劑生產(chǎn)企業(yè)在問如何保證試劑生產(chǎn)過程的質(zhì)量控制。
  檢測試劑的生產(chǎn)質(zhì)控與診斷試劑的評價(jià)既有相同點(diǎn),因?yàn)槎际腔谙嗤脑u價(jià)指標(biāo);又有不同點(diǎn),生產(chǎn)過程會關(guān)注原料、半成品、成品,診斷試劑評價(jià)只針對成品。
  核酸檢測試劑原材料有如下這些:
  1、dNTP
  脫氧三磷酸核苷,核酸的組成成分,包括:dATP、dUTP、dGTP、dCTP和dTTP。應(yīng)為HPLC純、PCR級,無DNase和RNase污染。-20℃保存。
  2、引物
  由一定數(shù)量的核苷酸構(gòu)成的特定序列,通常采用DNA合成儀人工合成,合成后經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳或其他適宜方法純化。凍干粉,1800D以上。序列正確。純度應(yīng)達(dá)到電泳級(PAGE)或HPLC級,不含雜帶。應(yīng)提供合成機(jī)構(gòu)出具的合成產(chǎn)物的質(zhì)檢證明,如PAGE電泳結(jié)果或HPLC分析圖譜。應(yīng)作HPLC分析和紫外光吸收分析。以紫外分光光度計(jì)測定OD260nm/OD280nm的比值在1、6~2、0之間,可視為合格引物。-20℃保存。
  3、探針
  是指特定的帶有示蹤物(標(biāo)記物)的已知核酸片段(寡聚核苷酸片段),能與互補(bǔ)核酸序列退火雜交,用于特定核酸序列的探測。通常采用DNA合成儀人工合成,合成后經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳或其他適宜方法純化,在5-端標(biāo)記熒光素報(bào)告基團(tuán)或其他發(fā)光標(biāo)記物,在3-端標(biāo)記熒光素淬滅基團(tuán),并經(jīng)HPLC或其他適宜方法純化。
  4、Taq DNA聚合酶
  具有DNA聚合酶活性,無核酸外切酶活性及核酸內(nèi)切酶活性;具熱穩(wěn)定性,94℃保溫1小時(shí)后仍保持50%活性。-20℃保存。
  5、UNG(尿嘧啶糖基化酶)
  具有尿嘧啶糖基化酶活性,無核酸外切酶及核酸內(nèi)切酶活性,IU UNG在 37℃處理3分鐘后,103拷貝以下含U模版應(yīng)*降解,不能產(chǎn)生擴(kuò)增產(chǎn)物。-20℃保存。
  6、RT-PCR酶(反轉(zhuǎn)錄擴(kuò)增酶)
  具逆轉(zhuǎn)錄酶活性和DNA聚合酶活性,無核酸外切酶及核酸內(nèi)切酶活性;具熱穩(wěn)定性,94℃1小時(shí)后仍保持50%活性,-20℃保存。
  好了,以上便是關(guān)于核酸檢測試劑的相關(guān)內(nèi)容介紹了。
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